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 TEST ELISA

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Tiffany
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MessageSujet: TEST ELISA   Lun 30 Juin 2008 - 15:36

Tout d’abord…ELISA est l’abbreviation de Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay ce qui signifie aussi test d'immunoabsorption enzymatique

On peut utiliser ce test sérologique pour le dosage d’anticorps (utiliser dasn les tests de grossesse), certaines virus (HIV) ou bacteries ...on l’utlise pour demontrer le presence de certaines maladies comme la peste , la maladie de lyme, l’hepatite.

Le principe est de mettre le serum en contact avec des antigenes specifiques, ainsi se forment des complexes anticorps / antigenes..puis on on fait reagir ce complexe avec un autre anticorps associe a une enzyme (le plus souvent une alkaline phosphatase) ce qui provoque une reaction colorée...

Pour comprendre voici un schema...le modele le plus simple pour comprendre est le modele que j’âi appris en premier...

Au debut sur une plaque , avec 96 trous...on remplie avec un complexe BPO (benzylpenicillin)/BSA...Puis on laisse incuber...au bout de 2 heures a 37°...on nettoie la plaque puis on charge avec le premier anticorps appelle anti BPO(ce qui correspond au complexe) ...qui sera dilue sur la plaque, apres une incubation, on nettoie puis on charge avec un 2eme anticorps .

Celui-ci sera par exemple...chevre anti souris alkaline phosphatase.....ce qui signifie que cet anticorps a été fabriqué dans une chevre et est dirigé contre le premier qui a été fait dans une souris..puis incubation a nouveau...

Au final on va rajouter un solution contenant un substrat qui va faire reagir l’enzyme ...ceci provoque une reaction jaune....

Au final, la ou il y aura le plus de jaune sera l’endroit ou il y aura le plus d’antigene (virus, bacterie) ainsi a l’aide de standard..on peut determiner la quantite de virus...





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MessageSujet: Re: TEST ELISA   Lun 30 Juin 2008 - 16:03

Merci pour toutes ces explications Matou... j'ai pas tout compris... car c'est un peu technique... mais c'est super intéressant... Wink
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TEST ELISA
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